Amblyomma scalpturatum Neumann, 1906 (Acari: Ixodidae): confirmation in Acre State, Brazil, and description of parasitism in a human / Amblyomma scalpturatum Neumann, 1906 (Acari: Ixodidae): confirmação no Estado do Acre, Brasil, e descrição de parasitismo em um humano

Abstract Amblyomma scalpturatum is a tick species that is unique to South America. It is commonly associated with the Amazon biome and has been reported in some Brazilian states. This tick species exhibits host specificity: it parasitizes tapirs and suidae. Its role in transmitting pathogens to humans is still unknown. Amblyomma scalpturatum is known to be a human-biting tick; however, there is only one report showing that humans make suitable hosts for this species. The knowledge of tick fauna is lacking in the Acre State. This study collected free-living ticks with the aim of finding new records in Acre State. Collections were carried out in Amazon forest fragments in Rio Branco municipality. An A. scalpturatum specimen was identified and submitted sequencing of the ITS-2 gene. This study presents the first molecular confirmation of A. scalpturatum collected in situ in Acre State, North Region, Brazil. This study also presents the first record of a successfully completed feeding by an A. scalpturatum nymph on a human host in the North region of Brazil. Further investigation is needed to ascertain the complete life cycle of this tick species, its seasonality in the environment, and its relationship to pathogens and competence to transmit them.

Resumo Amblyomma scalpturatum é uma espécie de carrapato que ocorre apenas na América do Sul. Está comumente associada ao bioma da Amazônia e tem sido relatada em alguns estados brasileiros. Esta espécie de carrapato apresenta especificidade a hospedeiros: parasita antas e suídeos. Sua competência em transmitir agentes patogênicos a seres humanos é ainda desconhecida. Amblyomma scalpturatum é também conhecido por picar seres humanos; entretanto, há apenas um relato que evidencie que seres humanos sejam capazes de serem hospedeiros adequados. Ainda existem lacunas no conhecimento sobre a ixodofauna no estado do Acre. Neste estudo foram coletados carrapatos de vida livre com o objetivo de encontrar novos registros para o estado do Acre. Coletas de carrapatos foram realizadas em fragmentos de floresta Amazônica no município de Rio Branco. Um exemplar de A. scalpturatum foi identificado e submetido a sequenciamento do gene ITS-2. Este estudo apresenta a primeira confirmação molecular de A. scalpturatum coletado in situ no estado do Acre, região Norte, Brasil. Este estudo também apresenta o primeiro relato de parasitismo completo de uma ninfa de A. scalpturatum em um hospedeiro humano na região Norte do Brasil. Mais investigações são necessárias para elucidar o ciclo de vida completo dessa espécie de carrapato, a sazonalidade de seus estádios no meio ambiente, sua relação a agentes patogênicos e competência em transmiti-los.

Diferenciação morfométrica entre larvas de Amblyomma sculptum Berlese, 1888 e Amblyomma dubitatum Neumann, 1899 / Morphometric differentiation between larvae of Amblyomma sculptum Berlese, 1888 and Amblyomma dubitatum Neumann, 1899

Os carrapatos estão envolvidos em processos biológicos de uma grande variedade de organismos patogênicos. O gênero Amblyomma é o de maior importância médica, com a espécie Amblyomma sculptum Berlese, 1888 envolvida no ciclo de transmissão da febre maculosa brasileira (FMB). Neste estudo, objetivou-se a validação molecular para uma diferenciação na característica morfométrica e no tamanho de idiossoma de larvas de duas espécies de carrapatos, Amblyomma dubitatum Neumann, 1899 e A. sculptum. Larvas não alimentadas foram coletadas em duas áreas de transmissão para FMB, por meio da técnica de armadilha atrativa de CO2. Foram identificadas em nível de espécie por morfometria comparativa, análise molecular por PCR e sequenciamento genômico, com validação pela análise de concordância pelo teste Kappa. As larvas de A. dubitatum apresentaram um comprimento significativamente maior que as larvas de A. sculptum. Embora nenhuma outra espécie do gênero Amblyomma tenha sido testada neste estudo, essa técnica poderá ser utilizada nos locais onde levantamentos acarológicos prévios, baseados nos estádios de ninfa e adultos, indicaram a presença de apenas A. sculptum e A. dubitatum, geralmente mantidos por capivaras. Digno de nota, essa condição é muito comum ao longo das áreas endêmicas para FMB na região Sudeste do Brasil.(AU)

Ticks are involved in biological processes of a wide variety of pathogenic organisms. The genus Amblyomma presents the greatest medical importance, with the species Amblyomma sculptum Berlese, 1888 involved in the transmission cycle of Brazilian Spotted Fever (BSF). In this study, we performed a molecular validation of the morphometric differentiation based on the idiosomal length of the larvae of A. dubitatum and A. sculptum. Unfed larvae were collected in two BSF-transmission areas, using the attractive CO2 trap technique. Larvae were identified at the species level by comparative morphometry, molecular analysis by PCR and genomic sequencing, with validation through agreement analysis by the Kappa test. The larvae of A. dubitatum showed a significantly longer idiosomal length than A. sculptum larvae. Although no other species of the genus Amblyomma has been tested in this study, this technique can be applied to places where previous acarological surveillances based on adult and nymphal ticks stages have indicated the presence of only A. sculptum and A. dubitatum, usually sustained by capybaras. Noteworthy, this condition is very common among many BSF-endemic areas in southeastern Brazil.(AU)

Screening and Molecular Cloning of a Protective Antigen from the Midgut of Haemaphysalis longicornis

Vaccination is considered a promising alternative for controlling tick infestations. Haemaphysalis longicornis midgut proteins separated by SDS-PAGE and transferred to polyvinylidene difluoride (PVDF) membrane were screened for protective value against bites. The western blot demonstrated the immunogenicity of 92 kDa protein (P92). The analysis of the P92 amino acid sequence by LC-MS/MS indicated that it was a H. longicornis paramyosin (Hl-Pmy). The full lenghth cDNA of Hl-Pmy was obtained by rapid amplification of cDNA ends (RACE) which consisted of 2,783 bp with a 161 bp 3' untranslated region. Sequence alignment of tick paramyosin (Pmy) showed that Hl-Pmy shared a high level of conservation among ticks. Comparison with the protective epitope sequence of other invertebrate Pmy, it was calculated that the protective epitope of Hl-Pmy was a peptide (LEEAEGSSETVVEMNKKRDTE) named LEE, which was close to the N-terminal of Hl-Pmy protein. The secondary structure analysis suggested that LEE had non-helical segments within an alpha-helical structure. These results provide the basis for developing a vaccine against biting H. longicornis ticks.